近年来，乳酰化（Lactylation）作为一种新型的蛋白质翻译后修饰（PTM），在代谢调控、炎症应答和肿瘤发生等生物过程中展现出重要作用。由于其发生频率低、修饰位点多样且缺乏专一性抗体，乳酰化蛋白的研究面临技术瓶颈。为了实现对乳酰化蛋白的精准捕捉与定量，无标记定量（Label-Free Quantification, LFQ）技术正在成为主流选择。

一、乳酰化：连接代谢与表观遗传的新桥梁

乳酰化是一种赖氨酸残基的翻译后修饰，其来源于细胞内乳酸（Lactate）的积累。最早于2019年被发现，它标志着代谢中间产物可以直接调控基因表达，为“代谢-表观遗传”交叉研究打开新局面。研究表明，乳酰化在巨噬细胞炎症响应、肿瘤代谢重编程、干细胞分化等过程中发挥调控功能。例如，乳酸诱导的组蛋白乳酰化可上调促炎基因表达，提示其在肿瘤免疫微环境中可能具有关键作用。

二、为什么选择无标记定量技术研究乳酰化蛋白？

与TMT、iTRAQ等标记型定量方法相比，无标记定量技术在研究低丰度修饰蛋白（如乳酰化蛋白）时具有以下显著优势：

1、避免样品复杂操作，适合珍贵样本

乳酰化修饰通常在应激、缺氧等特殊生理条件下发生，样本获取难度大，数量有限。无标记定量无需进行稳定同位素或化学标记，减少样品损耗和实验误差，更适合珍贵组织样本或小鼠模型组织的研究。

2、更高的通量与数据覆盖率

基于高分辨质谱平台（如Orbitrap Exploris 480）的无标记定量技术，能够实现对上万个肽段的深度扫描与精准定量，利于系统解析乳酰化修饰的蛋白谱图及其动态变化。

3、灵活整合富集策略，提升检测灵敏度

乳酰化修饰的丰度较低，需结合特异性抗体富集或亲和纯化技术。无标记定量策略可以灵活整合富集前后的蛋白组学分析，精准识别修饰位点并量化表达水平差异。

三、实验流程优化：精准捕捉乳酰化蛋白的关键

在百泰派克生物科技的蛋白组学平台中，我们构建了一套针对低丰度PTM的无标记定量流程，适用于乳酰化等新兴修饰的研究。以下是核心实验策略：

1、样本裂解与蛋白提取

采用高效裂解液（含去磷酸酶、去乙酰化酶与去乳酰化酶抑制剂），确保蛋白修饰状态的稳定性。

2、蛋白酶解与肽段纯化

使用Trypsin或Lys-C酶进行充分酶解，结合C18固相萃取净化肽段，去除盐离子及干扰物质。

3、乳酰化修饰肽段富集

应用商业化抗-乳酰赖氨酸抗体（Anti-Kla）进行免疫亲和富集，提高乳酰化肽段的检出率。

4、LC-MS/MS无标记定量分析

基于高分辨率Orbitrap MS平台，结合DDA或DIA采集模式，构建深度蛋白组图谱。配套MaxQuant、Spectronaut等分析软件进行定量计算和统计分析。

5、数据挖掘与功能注释

通过GO、KEGG、PPI网络等生物信息学工具解析乳酰化蛋白的功能富集、生物通路及关键调控节点。

四、百泰派克生物科技的优势服务

1、一站式乳酰化蛋白组解决方案：从样本制备到数据解读，全面支持低丰度修饰研究；

2、高灵敏质谱平台：Orbitrap Exploris 480 / timsTOF Pro 2，支持DIA、DDA双模式采集；

3、专业PTM富集试剂体系：定制化乳酰化肽段富集方案，兼顾灵敏度与特异性；

4、深度生信支持：个性化通路分析、转录调控网络挖掘、可视化报告交付。

乳酰化作为代谢与表观遗传学交叉的核心节点，其研究价值正在快速显现。无标记定量技术以其灵活、高通量、低样本需求的特点，为乳酰化蛋白的精准捕捉提供了强有力支持。在百泰派克生物科技，我们持续探索并优化蛋白组学技术平台，助力科研人员从修饰谱图走向生物机制，为乳酸信号的研究提供可靠的技术保障。如您有关于乳酰化蛋白组或其他PTM研究的技术需求，欢迎联系百泰派克生物科技，我们将为您提供专业建议与个性化解决方案。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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