产品内容：

试剂一：液体90mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体0.1mL×1支，－20℃保存。

试剂四：粉剂×1瓶，室温保存。临用前配制，加入5mL试剂一，充分溶解。

试剂五：液体5mL×1瓶，4℃避光保存。

标准品：液体1mL×1支，1mmol/L柠檬酸标准液，4℃保存；临用前稀释成250μmol/L柠檬酸标准液。

产品说明：

    CA是生物体内常见的有机酸，是重要的食品风味物质。此外，CA是三羧酸循环第一步反应的产物。

    酸性条件下，柠檬酸还原Cr⁶⁺生成Cr³⁺，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。

试验所需自备仪器和样品：

可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL比色皿和蒸馏水。

操作步骤：

一、样品中柠檬酸提取：

1. 液体样品中柠檬酸提取：取0.1mL液体加试剂一0.9mL，充分混匀，11000g/min 4℃离心10min，取上清液，待测。

2. 组织中柠檬酸提取：称约0.1g组织，加入1mL试剂一，冰上充分研磨，11000g/min 4℃离心10min，取上清液，待测。

3. 线粒体中柠檬酸提取：称约0.1g组织，加入1mL试剂一，冰上充分研磨，600g/min，4℃离心5min；取上清至另一EP管中，11000g/min，4℃离心10min，弃上清（此上清液可用于细胞质CA含量测定）；向沉淀中加试剂二200μL，以及试剂三2μL，充分悬浮溶解，11000g/min，4℃离心10min，取上清液，待测。

二、测定：

1. 分光光度计预热30 min以上，调节波长到545 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂一置于30℃水浴中预热30min以上。

相关文献：

《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影响因子:5.959 PMID:30850587
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影响因子: PMID:30453281