Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒
品牌：Solarbio | 货号：P1320
| 商品货号： | 商品品牌： | 规格 | 基本售价： | 选择规格 |
|---|---|---|---|---|
| P1320-25T | Solarbio | 25T | 300.00元 | |
| P1320-50T | Solarbio | 50T | 450.00元 | |
| P1320-100T | Solarbio | 100T | 800.00元 |
| 英文名称 | Tris-Tricine-SDS-PAGE |
|---|---|
| 储存条件 | 2-8℃，避光,有效期1年 |
| 单位 | 盒 |
产品简介：常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子蛋白，对于相对分子量小的，尤其是10 kD 以下的蛋白分辨率极低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分离分子量在1-10 kD的蛋白及多肽，成为目前电泳法变性分离多肽的主要方法。本产品包括Tricine-SDS- PAGE 凝胶制备所需全套试剂，只需自备蒸馏水，即可制备高质量各种浓度的凝胶，方便、快捷，电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。。
注意事项：
1、10%APS配制后分装-20 度保存。APS溶液不稳定，应尽量减少室温存放时间，每次取用后立即放回冰箱，以防失效；若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换，使用-20 度保存的10%APS。
2、在凝胶配制过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。
3、在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作，加水时速度不能太快。
4、丙烯酰胺具有神经毒性，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
5、本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。
配胶说明：
根据目的蛋白分子量大小选择合适的 PAGE 分离胶配制浓度，凝胶浓度配方参考附表。
I 配制分离胶
1、将不同体积的双蒸水、49.5%T 6%C 、凝胶缓冲液和甘油加入到离心管中混合。
2、加入 10% PAGE 胶凝固剂和 PAGE 胶促凝剂，立即涡旋混匀 5-10 秒，以使溶液充分混匀。
3、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液（1 mm mini-gel，分离胶溶液加约 4 ml ），然后在分离胶溶液上轻轻
覆盖一层 1-3 cm 的水层，使凝胶表面保持平整。
4、静置，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
II 配制夹层胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水尽量吸去。
1、将不同体积的双蒸水、49.5%T 3%C 和凝胶缓冲液加入到离心管中混合。
2、加入 10% PAGE 胶凝固剂和 PAGE 胶促凝剂，立即涡旋混匀 5-10 秒，以使溶液充分混匀。
3、将适量的夹层胶溶液迅速加至分离胶的上面（对于 1 mm 的 mini-gel，夹层胶溶液加约 1 ml ）， 然后在夹层
胶溶液上轻轻覆盖一层水层，使凝胶表面保持平整。
4、静置，待夹层胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
III 配制浓缩胶
去除覆盖在夹层胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。
1、将不同体积的双蒸水、49.5%T 3%C 和凝胶缓冲液加入到离心管中混合。
2、加入 10% PAGE 胶凝固剂和 PAGE 胶促凝剂，立即涡旋混匀 5-10 秒，以使溶液充分混匀。
3、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
4、待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
5、进行电泳操作。
IV 电泳
将电泳槽放入 4℃或冰水浴中，外槽加入阳极缓冲液（T1225），内槽加入阴极缓冲液（T1215），30V 预电泳 10min，
将样品（已经过 Tricine 专用上样缓冲液 P1325 处理）加入点样孔后 30V 电泳 1 小时，100V 电泳至溴酚蓝到达胶底
部后停止电泳，进行后续的考马斯亮蓝染色或电转。
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