参加Duolink® PLA® 技术webinar，掌握蛋白互作研究利器！
实现在内源表达水平检测蛋白质-蛋白质之间的相互作用，
想知道更多有关Duolink技术以及它在不同领域中的应用
该系列讲座共有5场：
– 时 间：9:00AM CST, Tuesday, March 10, 2015
– 主讲人：Ola Söderberg博士, 高级讲师，Uppsala University
Tom Juehne博士, 首席科学家，Sigma-Aldrich
内容简介：
蛋白互作或信号转导网络的动态检测可通过原位PLA实验得以呈现，Ola Söderberg博士将详细讲述如何利用原位PLA技术研究蛋白-蛋白互作、蛋白翻译后修饰和蛋白-DNA互作，配合使用原位PLA技术和锁式探针，在分析信号转导的同时还可以进行组织样品中mRNA表达的基因分型分析。Tom Juehne博士将进一步讲述Duolink PLA技术在其他生命科学领域的应用，包括在内源表达水平检测、定量和定位蛋白互作、蛋白表达和翻译后修饰，全方位证明Duolink PLA技术是一种强大的多功能检测工具。
– 时 间：9:00AM CST, Tuesday, March 17, 2015
– 主讲人：Joe Roethele博士, 抗体生产主管, Bethyl Laboratories
– 时 间：9:00AM CST, Thursday, March 26, 2015
– 主讲人：Eric B. Haura M.D., Moffitt肺癌中心主任, Moffitt Cancer Center
内容简介：
质谱和Y2H等其他技术虽然可解析癌症等疾病相关的蛋白复合体或较大的蛋白互作，但因此得到的信息很难应用到人类样本的研究中。为了攻克此难题，Eric博士的团队利用PLA技术直接检测人类肿瘤组织、小鼠异种移植模型中EGFR信号转导相关复合体，揭示了EGFR和GRB2的互作在EGFR和MAPK信号转导通路中的作用。他们研究了近300个肿瘤PDX模型，发现EGFR/GRB2信号转导相关复合体水平异常的肿瘤对EGFR抗体药物治疗方法更敏感。最终结果表明，对癌症组织中信号转导相关蛋白复合体的研究，不仅可以揭示疾病的致病机理，更有利于发现更有效的癌症治疗方案。
– 时 间：9:00AM CST, Tuesday, April 14, 2015
– 主讲人：Vikas Palhan博士, 高级研究员, Sigma-Aldrich
内容简介：
在基因组水平研究诸如DNA或组蛋白甲基化等表观遗传学标记的方法很多，但随着科学的发展，科学家需要进一步可视化单个细胞中单个基因位点的表观遗传学标记，而这类研究亟待需要一种具有极高灵敏度的检测方法。为了实现该目的，研究者综合运用原位杂交、近位连接技术和显微成像等技术成功检测了SEPTIN9启动子的DNA甲基化，而SEPTIN9启动子甲基化是结肠癌的已知生物标记。
在该实验中，作者利用生物素标记的核酸探针特异杂交SEPTIN9启动子的CpG岛，随后使用生物素和甲基化抗体进行Duolink实验，通过荧光显微镜成像分别显示了转移性前列腺癌DU145细胞(Chr17二倍体)中有2个阳性信号，结肠癌SW480细胞(Chr17三倍体)中有3个阳性信号。此外，通过Duolink实验还可以监测前列腺癌细胞(DU145)中，EZH2组蛋白甲基化转移酶和H3K27me3表观遗传学标记的相互作用，以及SAHA和GSK343抑制剂对EZH2活性的影响。
在该实验中，作者利用生物素标记的核酸探针特异杂交SEPTIN9启动子的CpG岛，随后使用生物素和甲基化抗体进行Duolink实验，通过荧光显微镜成像分别显示了转移性前列腺癌DU145细胞(Chr17二倍体)中有2个阳性信号，结肠癌SW480细胞(Chr17三倍体)中有3个阳性信号。此外，通过Duolink实验还可以监测前列腺癌细胞(DU145)中，EZH2组蛋白甲基化转移酶和H3K27me3表观遗传学标记的相互作用，以及SAHA和GSK343抑制剂对EZH2活性的影响。
– 时 间：9:00AM CST, Tuesday, April 28, 2015
– 主讲人：J. Matthew Rhett博士, Medical University of South Carolina
内容简介：
间隙连接(Gap junctions)是大的细胞间通道聚合体，有利于小分子和离子在细胞间相互传递。间隙连接是由半通道相互作用形成的，在多种组织功能中，间隙连接和半通道都发挥着重要的生理和病理学作用，包括心脏动作电位传播、肿瘤生长和转移、炎症反应和适应性免疫、伤口愈合以及中枢神经系统中的电突触传递等。表达最广泛的连接蛋白异构体是Cx43，其在上述组织功能中的调控已经成为间隙连接研究的焦点。
作者利用Duolink PLA技术研究了培养的细胞中Cx43的互作，该技术的特异性和亚细胞定位显示，结合使用共聚焦荧光显微镜技术，使研究者对间隙连接的超微结构、动作电位传导和Cx43穿梭的调控机制等都有了更深刻的认识。
作者利用Duolink PLA技术研究了培养的细胞中Cx43的互作，该技术的特异性和亚细胞定位显示，结合使用共聚焦荧光显微镜技术，使研究者对间隙连接的超微结构、动作电位传导和Cx43穿梭的调控机制等都有了更深刻的认识。