mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix (with UDG)
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| mTTx DNA/RNA聚合酶为对TTx聚合酶进行电子重构架，改变了TTx的活性配体中心，使其在Mg2+条件下仍然具有极强的逆转录活性。mTTx DNA/RNA Polymerase在Mg2+条件下对于DNA模板和RNA模板扩增能力几乎无偏差，这种独有的特性使得mTTx不再受限于反应Buffer系统，增加了其应用的拓展性，使得多种类型的实验得以实现，包括：采用单酶进行TaqMan RT-PCR、在单管相同的Buffer系统中对RNA和DNA进行多重检测、超多重的RNA模板扩增、RNA的NGS建库、高保真RT-PCR扩增等。 mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix(with UDG)中dTTP大部分被dUTP替代，因此扩增产物带有dUTP碱基，在配合热敏UDG（该酶在92℃热变性5min后不可逆失活，不影响后续PCR反应）消化的情况下，可有效降低气溶胶污染现象；在105 copies污染物的测试条件下，Ct推迟12个以上（污染去除能力>99.98%），因此该qPCR Mastermix在一步法qPCR反应中具有良好的去除核酸气溶胶污染的能力。 |
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主要特征 |
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单位定义 |
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| 一个活力单位即在在68°C条件下，30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。 | |||||||||||||||||||||||||
储存 |
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| -20℃可保存3年，避免反复冻融。 | |||||||||||||||||||||||||
实例展示 |
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| 1.首先使用含dUTP的mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix扩增三种基因产物（GAPDH,AFSV P72,Covid-19 N Gene），然后以105拷贝的含U产物作为模板,分别用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix（with UDG）和mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix进行扩增，反应结束后统计两组之间的△Ct，结果为：这三个基因的△Ct值分别为12.3、13.4、12.9；△Ct值越大说明去除残留产物的效率越高，表明该mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix（with UDG）具有良好的去除残留模板的能力。 | |||||||||||||||||||||||||
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| 2. 以2019新冠病毒N基因体外转录RNA直接作为模板，应用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix对不同拷贝的目标RNA进行TaqMan qPCR扩增，结果表明不同拷贝数的RNA，扩增性能良好。 | |||||||||||||||||||||||||
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| 3. 应用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix对不同拷贝的目标DNA和RNA进行TaqMan qPCR扩增，结果表明该产品对DNA模板和RNA模板扩增几乎无偏差，RNA模板比DNA模板更容易检出。 | |||||||||||||||||||||||||
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| 4.将不同数量的Jurkat细胞直接加入到TaqMan PCR反应体系中，应用mTTx RNA Probe RT-qPCR MasterMix进行内参基因GAPDH的TaqMan qPCR扩增。 | |||||||||||||||||||||||||
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